冷胁迫是导致农粮食作物收获量的重点区域挑戰组成。钙根据性核蛋白激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）移动信号传导到上皮细胞并更改密码对逆境中成长加载的重点调结因素，但其干预策略尚不知晓。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷过酸遮盖位点测试服务。

日语版头：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文名字题头：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

消费者公司的：浙江大学

探索材料：番茄

拜谱提供了技术应用：磷硝化作用体现位点在线检测

调查策略：

一、实验結果

1、CPK27在高低温胁迫下描述上涨，因此激发主茎耐热性

自始探究证明，CPK27在冷胁迫必备条件下形容方式上浮。为校验该结局，本篇文章中作著适用CPK27的两位敲除突变的系（cpk27 #2，#6）实现耐冷性软件测试，感觉CPK27的转录能力同质性低过對照组（图1a-b）。在CPK27形容方式被减缓的观赏植物中，对耐冷性的资料反应同质性衰弱。逐步一个脚印的亚生殖内部wifi定位与成功激活探究证明，冷胁迫带动CPK27向生殖内部核积累了，并资料其磷过酸能力（图1 f）。免疫力印记进行分析逐步一个脚印断定冷胁迫引导 CPK27 在核内淀粉酶丰度加大、胞内丰度提高，外源CaCl₂治理 可环节回到cpk27的冷敏感度表型，证明CPK27依懒Ca²⁺网络信号起着反应。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺忽略办法不断增强番茄抗寒性

2、CPK27能够调整黄吩噻嗪炼制途经减缓高温断裂

转录组测序但是表现，CPK27的过表达出来出来取得上涨黄胺类生物制品转化成视频相关的dna，如CHS、CHI和FLS等，而且黄胺类新陈代谢信号通路取得含有。而CPK27甲基化体中这么多dna表达出来出来降低，的提示CPK27确认提高黄胺类转化成视频好处茎叶缓减温度过低胁迫产生的腐蚀工作压力（图2a-e）。

图2 RNA-seq分享CPK27政策调控的冷崩溃表观遗传

3、HY5是CPK27介导的抗寒数据信号通路中的关键的靶标

为认证 CPK27 与 HY5 的之间反应，著者先是实施了酒曲双交配（Y2H）测试报告英文，最终效果得知三者存有之间反应（图3a）。双氧分子荧光相容（BiFC）测试报告英文进的一步体现了CPK27 与 HY5 在血细胞内遭受之间反应（图 3b）。陆陆续续可以通过免役共结晶等技术设备，遇到HY5与CPK27在草本植物机体存有之间反应，且三者的之间反应更具钙阴阳离子（Ca²⁺）依赖关系性（图 3c）。最后，在Co-IP测试报告英文的核蛋白分离出来前施加压力冷胁迫处里，最终效果凸显冷胁迫可增加HY5与CPK27的之间反应（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷酸性反应其关键点位点

4、CPK27磷硝化作用HY5不断增强其转录抗逆性，促进会黄大环内酯dna表现

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷过酸装饰位点查测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷酸性反应HY5并提升其稳定可靠性

5、CPK27 在类黄酮生物工程分解径路中角色于HY5的品牌进入校园市场

宗合DNA表达爱和消化吸收物研究毕竟（图5），CPK27在冷胁迫出错过程中 中使用于HY5的上中下游，用房产调控 HY5 介导的类黄酮生物学获得通道印象花草耐寒性性。

图5 CPK27反应于HY5上中下游

二、优秀文章个人心得体会

以上另一方面，文中科研体现了CPK27磷过酸遮盖HY5血清，激发类黄酮制成条件，帮助抗脱色化合物积攒，继而提升耐冷工作能力。该科研体现了了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调空制度化（图6），确认CPK27介导的HY5磷过酸是连接方式钙卫星信号与次生代谢率防止的关键性部分，为掌握观赏植物挫折出错微信网络出具了新画面。

图6 CPK27-HY5包块不断提高观赏植物接受冷胁迫的逻辑

三、拜谱总结ppt

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的核血清组学、绘制核血清组学、代谢转化组学、转录组学等多个学的产品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

基准专著：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134